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第二節(jié) 鱘魚人工繁殖技術(shù)

第二節(jié) 鱘魚人工繁殖技術(shù)

一、親魚培育

()后備親魚的選留

親魚是苗種生產(chǎn)無可替代的物質(zhì)基礎(chǔ),苗種質(zhì)量與親魚培育有直接關(guān)系,而后備親魚的選留是親魚培育的第一步,也是最關(guān)鍵的一步。后備親魚選留的基本原則:一是遺傳背景清楚,保證品種純正;二是逐級選留,具體做法是,從一齡開始至成熟期,根據(jù)養(yǎng)殖生產(chǎn)對親魚優(yōu)良性狀的要求,分3-4次對后備親魚群體進行選留,逐步淘汰不符合要求的個體。最后作為親魚保留的比例約為每批魚初始總數(shù)的10%左右。

()魚池培育條件

鱘魚系大型河道魚類,寬松的培育條件能為親魚的生長發(fā)育提供良好的環(huán)境。特別是親魚培育的后1-2年,池塘形狀、魚池規(guī)格、底質(zhì)條件、水流量、水質(zhì)、水溫、噪音等,都會對親魚的最終成熟產(chǎn)生影響。因此,不論是池塘還是網(wǎng)箱養(yǎng)殖,培育后期盡可能將親魚移入專門的培育池中。池塘最好是近似圓形或橢圓形,規(guī)格不小于100平方米,有條件的可以設(shè)置砂底,保證水量充足、水質(zhì)清新。如果只有網(wǎng)箱條件,培育親魚的網(wǎng)箱須有足夠大的規(guī)格和深度,水交換要好。建議網(wǎng)箱規(guī)格在36平方米以上,水深不低于6米。

()培育管理

1.培育環(huán)境

后備親魚的前期培育環(huán)境與商品魚養(yǎng)殖沒有大的區(qū)別,而產(chǎn)前1-2年的培育環(huán)境對親魚的發(fā)育成熟至關(guān)重要,除保證充足的溶氧和穩(wěn)定的水流外,應該增加一些特別的措施:一是進行雌雄鑒別,分池飼養(yǎng);二是密度控制,減少高密度脅迫對親魚性腺發(fā)育的影響,盡可能保證親魚有寬松生長環(huán)境。單位面積的放養(yǎng)重量可控制在商品魚放養(yǎng)量的30%-50%

2. 營養(yǎng)與飼料

鱘親魚飼料的組成與商品魚有所不同,相對蛋白高、脂肪低。目前國內(nèi)已有飼料企業(yè)開始生產(chǎn)親魚專用飼料,可以采用符合親魚營養(yǎng)需求的專用商品飼料培育親魚。在沒有合格專用飼料的情況下,也可自行配制親魚飼料,在商品魚飼料中加入適量(30%左右)的冰鮮雜魚或蝦,在產(chǎn)前1-2年內(nèi)的主要生長季節(jié)投喂。

3.培育溫度調(diào)控

鱘魚性腺的生理成熟與水溫的周期變化有很密切的關(guān)系,需要一定的低溫刺激。一般情況下,在持續(xù)超過15℃的水溫中培育,親魚性腺可以生長,但達不到成熟,不能正常排卵,特別是施氏鱘等一些對溫度要求較嚴格的種類,性腺的生理成熟要求有產(chǎn)前不少于2個月的低溫(4℃左右)刺激。因此,水溫調(diào)控問題,在培育池塘地理條件選擇和設(shè)施配備上都應加以考慮。

4.產(chǎn)后培育

鱘魚屬大型、高壽、一生多次產(chǎn)卵的魚類,繁殖周期的長短依種類不同而異。其中養(yǎng)殖的施氏鱘多為每2年生產(chǎn)一次,西伯利亞鱘和小體鱘多為每年生產(chǎn)一次。產(chǎn)前的親魚有相當一段時間不攝食,加之人工催產(chǎn)和繁殖操作,產(chǎn)后親魚消耗大、體質(zhì)弱,需要加強營養(yǎng)恢復體質(zhì),及時投喂全價飼料有助于親魚性腺的再次發(fā)育。

二、人工催產(chǎn)與授精

(一)繁殖時間的確定

1.自然狀態(tài)下,大多數(shù)種類的鱘親魚是在經(jīng)過越冬后、水溫回升至13℃左右時開始產(chǎn)卵,黑龍江的施氏鱘和達氏鰉的繁殖在每年春季的56月份,引進的俄羅斯鱘、西伯利亞鱘、小體鱘、匙吻鱘等也都屬于春季產(chǎn)卵的類型(長江的中華鱘例外,屬秋季產(chǎn)卵類型),產(chǎn)卵時間均與水溫的周期變化密切相關(guān)。

2.目前,我國從南到北都有鱘魚養(yǎng)殖,繁殖時間差異較大,南部地區(qū)溫度回升較早,養(yǎng)殖的鱘魚可在3月份產(chǎn)卵,北方地區(qū)溫度回升較遲,產(chǎn)卵在5-6月份。養(yǎng)殖鱘魚的繁殖生產(chǎn)需要根據(jù)各地水溫回升的具體情況而定,在溫度達到13℃時即可著手開始人工繁殖工作。

3.根據(jù)上述規(guī)律,有條件的繁殖場可以通過人工調(diào)節(jié)溫度變化周期,提前或延遲鱘魚的產(chǎn)卵時間。如果需要提前繁殖,可以提早升溫;需要延遲產(chǎn)卵,可以推遲提溫時間。

()成熟度鑒別

非生殖期的雌雄魚無明顯差異,生殖期的雌雄魚體征有所不同,但沒有婚姻色或追星之類的副性特征。所不同的是,成熟欲產(chǎn)雄魚體瘦、吻尖、脊板尖、體表粘液多、腹壁薄、腹部大且柔軟富有彈性。野生的成熟雄親魚較易鑒別,可將魚體背尾部彎曲成“弓”狀,用手輕壓生殖孔有少許精液流出。人工養(yǎng)殖的雄親魚通常不易鑒別,只檢察雌魚即可,因雌雄成熟基本是同步的。雌魚除具備上述表性特征外,更重要的是檢查卵細胞的發(fā)育狀況。用特制的挖卵器從生殖孔探入卵巢后中部,取少許卵粒,檢查卵粒色澤、形狀、極化程度等。

()催情用藥種類及劑量

1.用藥種類:施氏鱘人工催產(chǎn)所使用的藥物主要有鯉科魚或鱘魚腦垂體及促黃體素生成激素(LRH-A)。

2.催產(chǎn)藥物的注射部位及次數(shù):鱘魚的催產(chǎn)都可以采用肌肉注射方法,需要注意的是,個體較大的親魚用藥量也大,最好采用多點注射的方法,以防藥物流失或?qū)︳~體局部產(chǎn)生不良影響。

在自然產(chǎn)卵場捕獲的野生雄性親鱘,性腺成熟較好,通常不需要注射,輕輕壓腹部就有精液流出。如果對雄魚擠壓腹部也無精液流出,則需進行一次注射。野生雌魚的注射次數(shù)主要視其性腺發(fā)育的成熟程度而定,一般成熟度好,性腺已處于Ⅳ期末的,采用一次注射即可。若性腺成熟較差或成熟不夠完善,則需采用二次或三次注射。

池塘或網(wǎng)箱培育的鱘親魚,不論雌雄都需要人工催產(chǎn),雄魚通常只需注射一次,雌魚需根據(jù)性腺發(fā)育情況而定,通常需要注射兩次。

3.用藥劑量:無論用何種藥物進行催產(chǎn),均需依據(jù)親魚發(fā)育狀況來確定注射藥物的劑量和催產(chǎn)方法。使用鱘魚腦垂體,雌鱘的注射劑量以每10kg體重為單位進行劑量的計算,雄鱘如需注射,其劑量一般為雌鱘注射劑量的1/151/10;選用LRH-A做催產(chǎn)劑,雌魚總劑量為每千克體重注射39微克(視親魚成熟情況定總量),第一次注射10%20%1012小時后第二次注射其余藥量;雄魚注射用量為雌魚的一半,一次性完成。

()效應時間

以人工養(yǎng)殖的施氏鱘、西伯利亞鱘為例:雄親魚在注射后68小時即可采集精液;雌親魚多在第二次注射后的820小時排卵。經(jīng)驗表明,成熟度好的親魚催產(chǎn)效應時間短,成熟度差的親魚催產(chǎn)效應時間要長;催產(chǎn)溫度高效應時間短,溫度低效應時間長。有資料表明:同一批親魚,當平均水溫16.5℃時,效應時間為18小時;平均水溫19時,效應時間為11小時。因此,第二次注射后應定時觀察親魚的活動及排卵情況,及時取卵。

()精液的采集和儲備

將達到效應期的雄魚固定的鋪有濕毛巾的平臺上,揩干生殖孔周圍表皮的水,用預先準備好、下接塑料采精袋的塑料軟管,輕輕插入生殖孔,輔助輕壓腹部,精液會通過軟管自動流入采精袋。采到的精液少量充氧,單獨封好,放在14℃冰箱內(nèi)保存。采精后的親魚放回暫養(yǎng)池,每隔2小時左右可以重復采精,通常一尾雄魚可重復采精57次。由于鱘雄魚的精液成熟后在體內(nèi)較難保留,易因受驚嚇或劇烈游動而排出流失,每次從暫養(yǎng)池中取出親魚的操作要輕、快,同時應用布塞住生殖孔,并及時收集精液。

()成熟卵子的獲得

根據(jù)鱘親魚的生存條件和成熟度狀況,用于人工繁殖的成熟卵采集,有三種方法可供選擇,即殺魚取卵法、擠壓法和活體手術(shù)取卵法。

1.殺魚取卵法:取卵前,先切斷雌魚的鰓動脈或尾動脈放血,然后剖開腹腔取卵。這種方法雖可取出全部成熟卵,親魚也同時被斷送了,目前,在養(yǎng)殖鱘魚的人工繁殖中已完全摒棄了這種方法。

2.擠壓法:與常規(guī)養(yǎng)殖魚類人工繁殖操作基本相同,由于鱘魚輸卵管很長,其喇叭口開于腹腔中部,人工擠壓操作的方向有所不同。雌魚達到成熟排卵后,用手先從雌魚腹后部向前推壓,再由前向后推壓,目的是將體腔后部的游離卵粒盡可能地擠入喇叭口,再經(jīng)輸卵管產(chǎn)出。一般情況下,這樣的操作要每隔1小時左右進行一次,有時需重復34次才能完成。盡管如此,也很難把所有成熟卵擠出,總會有相當一部分擠不出來。采用擠壓法,每次操作都需把親魚重新從水中撈出再放回去,比較麻煩,而且隨著擠卵次數(shù)的增加和時間的延長,卵的受精率會越來越低。但此法能有效地保留親魚,適用于較小型或成熟度很高的親魚。

3.活體手術(shù)取卵:達到效應時間,雌魚生殖孔會有卵排出。此時先將親魚麻醉,腹面向上放在鋪有濕毛巾的操作臺上。在腹中線生殖孔上方約10厘米位置,切開一個23厘米的小口,此時成熟卵會從切口處流出,需用容器接取。大多數(shù)情況下,輔助人工擠壓可將成熟卵一次性取出。如遇卵巢隨卵一起堵在切口,阻礙卵子流出,可用經(jīng)消毒的手術(shù)刀柄等工具,將出來的卵巢推回去再擠。擠卵完成后,用醫(yī)用縫合針和尼龍線縫合切口,消毒處理后,將親魚放入恢復池中。鱘魚活體取卵手術(shù)技術(shù)已相當成熟,操作得當,成功率可達到100%

()成熟卵子的人工授精

鱘魚成熟卵的人工授精主要采用干導法,即先將卵置于盆中,每盆約47萬粒卵。加入12ml精液,攪動精卵,使其充分混合。加入與孵化溫度相同的清水,繼續(xù)攪拌約5分鐘之后,倒掉上面的體腔液和多余的精液,再漂洗23次,授精工作即已完成。鱘魚的精子大,而且激活后的壽命較長,因此也可以采用先加水激活精子,立即倒入盛卵盆中的授精方法,這種方法更能有效提高受精率。

三、受精卵的孵化

()受精卵的脫粘處理

1. 泥漿脫粘法

泥漿是人們最早在魚類受精卵脫粘上使用的脫粘材料,來源廣泛,使用方便。采集干燥的河邊淤泥,沖洗并濾去所有的碎石。在沉淀并棄去上清液的過程中,得到約520un的顆粒河泥。然后將河泥曬干或烘干,集存于塑料袋內(nèi)備用。在0.5L的泥懸濁液和4L水中,加1kg受精卵,攪動4060分鐘,即可脫去卵的粘性。

2.化學藥物脫粘法

鱘魚卵脫粘的主要化學藥物有:尿素、Na2SO3NaCl、柔酸等。

脫粘方法:采集的受精卵盛于盤中,迅速用清水沖洗2次,用0.1%的柔酸處理1分鐘,再用0.4%的尿素和0.3% NaCl,或1.5% Na2SO3處理510分鐘。然后減少一部分柔酸,使其和淡水的比例為11,重復部洗三次,每次沖洗三分鐘,最后用清水沖洗3次,放入孵化器中孵化。

3.滑石粉脫粘法

脫粘劑為20%的滑石粉懸濁液。脫粘時,在盒中注入清潔的孵化水,加入提前泡好的滑石粉液,慢慢攪動魚卵,如果有卵粘連現(xiàn)象,用手撥開。每十分鐘換一次洗液,棄去舊的溶液,加入清水和滑石粉。重復這項操作至卵完全不粘手為止,并沖洗至水清為止,脫粘時間一般為3050分鐘。

4.脫粘操作方法的選擇

(1)手工脫粘法

即在脫粘過程中用手在脫粘容器中攪動卵,使之與脫粘劑不斷充分接觸,不發(fā)生粘連。直至卵不粘手為止。為不使溫度變化過大,應將脫粘容器放在孵化水中。攪動時動作必須輕而緩以卵能翻動與脫粘劑充分接觸為度。

(2)機械脫粘法

在機械脫粘法中,實際效果較好的是充氣脫粘。充氣脫粘的主要設(shè)備有氣泵和錐形瓶。氣泵的出氣口通過管路與錐形瓶的下口相連,脫粘時將受精卵和脫粘劑放入錐形瓶中,充氣使瓶中的卵不斷翻動。充氣量的調(diào)整,以卵和脫粘劑不在瓶底停留為度。脫粘達到要求的時間后。拔出充氣管,放出魚卵,沖洗后轉(zhuǎn)入孵化器。這種方法省力,傷卵機會少。

()受精卵孵化

1.常用孵化器的種類

(1)尤先科孵化器--亦稱淋水式孵化器,是目前國內(nèi)鱘魚孵化采用最多的一種孵化器。這種孵化器的孵化效果較好,但魚苗的收集必須人工從盛卵槽內(nèi)撈出,收苗工作量很大。

(2)鱘魚Ⅰ號孵化器---這種孵化器是目前俄羅斯最先進也是最普及的孵化器。這種孵化器的用水量每小時不到2m3,而每臺的孵化能力可達32kg受精卵。孵出的魚苗自動進入收集器內(nèi),可有效地節(jié)省用水和管理的勞動強度。

(3)瓶式孵化器---瓶式孵化器與前述脫粘器有些相似。不同的是孵化器供的是水而不是氣,瓶口處設(shè)有魚苗收集導槽。這種孵化器的用水量較大,其最大的優(yōu)點是在孵化期間不用消毒,壞卵因比重小而隨時流出。

(4)網(wǎng)箱孵化---有時規(guī)模較小的孵化或?qū)嶒炐苑趸谝巴鉄o法使用孵化器,可以采用篩娟制成的網(wǎng)箱放在微流水處孵化。這種方法無論從管理條件還是孵化效果上,都遠不如前面提到的孵化器。

2.孵化管理

(1)水溫與孵化效果的關(guān)系:在氧氣含量不低于其發(fā)育的正常標準時,鱘科魚類在不同溫度下胚胎發(fā)育有很大差別。在一定范圍內(nèi)隨溫度的升高而發(fā)育加快。

對不同水溫下孵化胚胎的出膜率統(tǒng)計表明,孵化水溫1315℃時,出膜率為25%左右,1719℃時為65%2022℃時為30%左右。

(2)孵化水量的控制:水量控制的原則是保證孵化用水中足夠的氧氣,及時排出胚胎發(fā)育過程中的廢物,同時還要兼顧撥卵器的定時動作。每種孵化器的供水量各不相同,應根據(jù)具體情況掌握。如:鱘魚Ⅰ號孵化器每臺每小時應保證在2m3左右,尤先科孵化器每臺每小時3m3左右,瓶式孵化器則必須保證魚卵能正常翻動,沒有不動的卵。孵化的前期,魚的呼吸量小,隨著胚胎發(fā)育的進行,呼吸量不斷加大,到出膜前最大。因此水量的調(diào)整也可從小到大,到出膜前達到應有的供水量。

(3)水霉控制:在孵化過程中,水霉是影響鱘魚孵化率的主要病害。水霉可以把活卵纏裹住,如不及時處理,被纏裹住的活卵與死卵形成塊后,會造成局部缺氧,活卵會因缺氧而死亡。使用瓶式孵化器不存在這個問題,由于死卵相對活卵的比重小,在孵化過程中通過調(diào)節(jié)水流,可以把死卵從孵化器中排出。使用其它幾種孵化器孵化鱘魚卵,對水霉的控制是孵化成敗的關(guān)鍵,一般的控制方法主要二種,一種是食鹽與小蘇打合劑(11),使孵化用水成8mg/l濃度;第二種是亞甲基藍,使孵化用水成2-3mg/l濃度。二種方法每天消毒一次,每次10-20分鐘。

(4)魚苗收集與計數(shù):魚苗收集方法與使用的孵化器種類緊緊相關(guān)。目前國內(nèi)使用較多的孵化器是尤先科孵化器,孵化出的魚苗必須人工從盛卵槽內(nèi)撈出,收苗工作量很大。比較先進的孵化器是瓶式和鱘魚一號孵化器,這兩種孵化方式都有魚苗導流槽,在導流槽的終端有一個小網(wǎng)箱用來收集魚苗。收集魚苗的時間根據(jù)網(wǎng)箱中魚苗的密度大小,一般出苗高峰時半個小時就要收集一次。

魚苗計數(shù)方法主要有二種:逐尾計數(shù)法與打樣法。逐尾計數(shù)法是指將孵出的魚苗一尾一尾地記錄下來。打樣法是將孵出魚苗暫時集中在一個固定的計量容器內(nèi)(一般用容積較小的容器,如小酒杯等),再計數(shù)容器內(nèi)的魚苗數(shù),取23次樣,再以平均數(shù)作為每一容器的魚苗數(shù)量,最后計算總的打樣數(shù)。


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